CFU는 Colony Forming Unit(콜로니 포밍 유닛)의 약어로 세균 검사 결과에 사용되는 단위입니다. 세균을 배지에서 배양하여 생긴 콜로니 (집단) 수입니다. 예를 들면 「400cfu/g」이면 1g당 400개의 콜로니가 존재한다는 의미입니다.
이번시간에는 CFU 계산 방법에 대해 소개를 하도록 하겠습니다.
CFU 계산의 개요
우선 큰 전제로서 살아있는 세균 하나가 하나의 콜로니를 형성한다고 생각합니다. 따라서 콜로니의 수 = 생균수로 계산합니다. 이 수를 CFU(Colony forming unit)로 나타내고, 예를 들면 CFU/ml라면 1ml의 배양액 중에 존재하는 박테리아의 수를 나타내게 됩니다.
간단히 정리하면 배양액 1ml를 플레이트에 뿌려 콜로니를 10개 셀 수 있으면, 배양액 1ml 중에는 박테리아가 10개 있다는 것이 되어, 이것을 10 CFU/ml로 표기 합니다.
생균 수를 세는 방법
1, 배양액을 희석한다. 10배, 100배, 10^(3)배,…라는 식으로 희석. (아래 표 참조)
2, 희석한 배양액을 배지에 뿌린다.
3, 콜로니 형성 후, 배지상의 콜로니 수를 카운트한다.
4, 그 중 콜로니 수가 30~300의 것을 신용할 수 있는 수로서 채용.
CFU 계산 방법
예를 들어 배양액을 10^(-5)까지 희석하여 100 ㎕를 배지에 뿌렸을 때, 배지 위에 생긴 콜로니의 수가 128이었다고 가정하면
100 μl = 0.1 ml 이므로
128 × 10^5 × 10 = 1.28 × 10^(8) CFU/ml
에 의해 원래의 배양액 1ml 중의 생균수가 추정됩니다.
CFU 계산 포인트
희석한 분 뿐만이 아니라, 배지에 뿌린 배양액의 양도 계산에 포함합니다. 물론 이때 희석하여 생긴 1ml를 전부 배지에 뿌린다면 계산에 포함할 필요는 없습니다.
콜로니가 대량으로 되어 겹쳐져 있거나 하는 경우는 셀 수 없다. 가장 희석한 것이라도 셀 수 없는 경우는 다시 한번 배양액을 만들어 희석하고 다시 세도록 합니다.
셀 수 있는 경우라도 콜로니 수가 많아 전부 카운트하기 힘든 경우는 유성 펜으로 플레이트에 십자를 써서 4등분하고, 그 중 하나의 분획에 있는 콜로니를 카운트하고 4를 곱합니다.